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Cre依赖的化学遗传激活 AA
发布日期:2025-01-04 16:15 点击次数:178
病毒用途:
化学遗传学技术/DREADDS 技术可以用来调控神经元或其他类型细胞的活动。例如将病毒注射到Cre小鼠的特定脑区,hM3D(Gq)在小鼠中表达后,通过腹腔注射或饮食等方式给CNO(clozapine-N-oxide),可以实现长时间范围(小时量级)的对神经元的激活。
名称释义:
rAAV: Recombinant adeno-associated virus, 重组腺相关病毒。以重组腺相关病毒为载体,安全性高(目前还没有发现rAAV对人体致病),免疫原性低(感染后很少被免疫系统所清除),表达时间长。
EF1α:elongation factor 1-alpha,人类靶向延长因子,广谱性强启动子。
DIO:Double-floxed inverse Orientation, 是和Cre重组酶配合控制目的基因表达的元件。如果没有Cre重组酶的话目的基因不表达,在有Cre 的情况下目的基因才能开始表达。
hM3D(Gq):hM3D(Gq)是从人毒蕈碱乙酰胆碱受体M3 上改造的仅对CNO(clozapine-N-oxide)有反应的人工受体(designer receptors exclusivelyactivated by designer drugs,DREADD),不再受乙酰胆碱激活。在一些神经元里,CNO 结合hM3D 后,激活Gq 蛋白偶联的磷酸酶PLCβ,引起PIP2被降解,从而使得被PIP2 关闭的KCNQ 外向钾离子通道被打开,以至于细胞膜去极化,形成动作电位,即激活神经元。在KCNQ 或是Gq 不表达的神经元里,hM3D 的功能可能会有所不同。
mCherry:红色荧光蛋白,激发波长587nm,发射波长610nm。
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